人γδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据

摘要：

目的探讨γδT细胞对结核杆菌抗原(Mtb-Ag)识别的分子机制. 方法采集人外周血(PB),分别经抗TCRγδ-PE和FITC标记的Mtb-Ag及其纯化的不同组分,结核杆菌高分子量蛋白组分(Mtb-HW-Ag)、低分子量多肽组分(Mtb-LW-Ag)或Mtb-Ag峰3单一主肽抗原(Mtb-Ag-Pk3)进行双标记染色,或使用过量Mtb-Ag先与细胞预处理,然后再做上述染色,用流式细胞仪检测γδT细胞上结合的抗TCRγδ-PE荧光强度变化.将人外周血PBMC经Mtb-Ag刺激24 h后,使用抗TCRγδ-PE和Mtb-Ag-FITC染色,用激光共聚焦显微镜观察γδT细胞表面TCRγδ分子的聚集. 结果经流式细胞仪分析,Mtb-Ag及其纯化的Mtb-LW-Ag、Mtb-Ag-Pk3均可与γδT细胞发生特异性直接结合,而且Mtb-Ag可有效阻断抗TCRγδ单抗与γδT细胞的结合.而Mtb-HW-Ag与γδT细胞并无特异性结合效应.经激光共聚焦显微镜观察,Mtb-Ag可显著激活γδT细胞而诱导TCRγδ分子发生功能性聚集化. 结论γδT细胞通过其表面的TCRγδ分子可直接结合Mtb-Ag,而Mtb-Ag-Pk3多肽可能是Mtb-Ag发挥其结合效应的有效成分.Mtb-Ag可激活γδT细胞并诱导TCRγδ分子聚集,而可能参与功能性脂筏(raft)的形成.

关键词：γδT细胞、结核杆菌、抗原、激光共聚焦显微镜、流式细胞术

所属期刊栏目：25

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30070721;安徽省自然科学基金2000jl161

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：15-20