铜绿假单胞菌PA-SD株外毒素A基因Ⅲ区的克隆及同源性比较

摘要：

目的测定脓胸(CF)病人铜绿假单胞菌分离株外毒素A(ETA)的ADP核糖转移酶(ADPRT)活性及其酶活区(Ⅲ区)序列的变化,为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供试验基础和理论依据. 方法采用PCR技术,以铜绿假单胞菌PA-SD株的染色体DNA为模板,扩增ETAⅢ区基因.将产物克隆于pGEMR-T Easy载体,鉴定后测序.用DNASTAR软件将测定的序列与GenBank中获得的其它CF分离株序列进行比较.同时平行测定PA-SD株与标准株PA103的ADPRT活性. 结果扩增出目的基因片段,长度为658bp,获得了重组质粒(PA-SD-ETA).测序结果表明,PA-SD株与所比较菌株的氨基酸的同源性在94.4%～98.1%之间,其中与标准株的同源性为98.1%.第608位发生了相对于所比较的全部分离株的突变,第515位发生Ser到Gly的突变,同时ADPRT活性比标准株PA103低. 结论本研究进一步阐明第515位氨基酸与ADPRT活性的关系,从而为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供理论依据.

关键词：铜绿假单胞菌、外毒素A、聚合酶链式反应、Ⅲ区基因

所属期刊栏目：23

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2003-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：666-669