利用新型表达载体一步获得HIV-1核壳蛋白p24纯品

摘要：

目的利用新型原核表达载体获得人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核壳蛋白p24纯品. 方法采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出HIV-1 HXB2株gag开放阅读框架的内壳蛋白p24的基因片段,将目的基因片段插入到新型表达载体pTXB中构建成重组表达质粒pTXB-p24.表达产物的纯品通过几丁质珠(chitin beads)的亲和与柱上DTT的剪切而得到.用SDS-PAGE和HPLC分析所得纯品的大小和纯度,用Western blot和胶体金实验检测其抗原性. 结果构建的重组表达质粒pTXB-p24经IPTG诱导得到C端融合Intein-CBD的p24蛋白,该蛋白通过几丁质珠(chitin beads)的亲和与柱上DTT的剪切得到纯化的非融合的p24重组蛋白.HPLC分析表明其纯度可达96%,胶体金结果显示纯化的p24可与HIV-1阳性患者的血清反应,具良好的抗原性. 结论利用新型原核表达载体可一步获得纯度为96%的非融合p24抗原纯品,为大规模生产该蛋白提供了可靠的保证.

关键词：人免疫缺陷病毒1型、核壳蛋白、基因表达、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：375-379