通过基因突变提高噬菌体蛋白Ⅷ介导的抗体Fab段的展示

摘要：

目的构建基因Ⅷ变种文库,筛选表面展示效率高的突变体,改进抗体分子在噬菌体表面的呈现效果.方法通过重叠PCR,在基因Ⅷ引入随机突变,克隆到抗乙肝表面抗原(HBsAg)的噬菌体抗体表达载体中,使抗HBsAg的Fab段通过蛋白Ⅷ展示于噬菌体表面,构建蛋白变种Ⅷ文库,筛选能使HBsAg表面呈现效果得到提高的蛋白Ⅷ突变体.结果构建了一个库容为6×108的基因Ⅷ变种文库,使用游离抗原竞争、硫氰酸盐洗涤等方法进行淘筛,获得多个展示活性高于野生型蛋白Ⅷ的突变体,其中2个最好的变种可使表面呈现效果提高50～70倍.结论通过对基因Ⅷ的改造可提高其对抗体Fab段的展示性能,获得2株可使展示活性提高50～70倍的基因Ⅷ突变体.

关键词：噬菌体表面展示、蛋白Ⅷ、噬菌体抗体

所属期刊栏目：22

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金30070706

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：591-594