10.3760/j:issn:0254-5101.2002.06.002
通过基因突变提高噬菌体蛋白Ⅷ介导的抗体Fab段的展示
目的构建基因Ⅷ变种文库,筛选表面展示效率高的突变体,改进抗体分子在噬菌体表面的呈现效果.方法通过重叠PCR,在基因Ⅷ引入随机突变,克隆到抗乙肝表面抗原(HBsAg)的噬菌体抗体表达载体中,使抗HBsAg的Fab段通过蛋白Ⅷ展示于噬菌体表面,构建蛋白变种Ⅷ文库,筛选能使HBsAg表面呈现效果得到提高的蛋白Ⅷ突变体.结果构建了一个库容为6×108的基因Ⅷ变种文库,使用游离抗原竞争、硫氰酸盐洗涤等方法进行淘筛,获得多个展示活性高于野生型蛋白Ⅷ的突变体,其中2个最好的变种可使表面呈现效果提高50~70倍.结论通过对基因Ⅷ的改造可提高其对抗体Fab段的展示性能,获得2株可使展示活性提高50~70倍的基因Ⅷ突变体.
噬菌体表面展示、蛋白Ⅷ、噬菌体抗体
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R392
国家自然科学基金30070706
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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591-594