人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定

摘要：

目的构建人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体,并进行原核表达和复性,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源.方法将人CD226分子的胞膜外区基因克隆人原核表达载体pBV220,测序证实后,转化宿主菌MC1061/P3并进行温度诱导表达.产物采用稀释加透析法复性,亲和层析柱纯化,并通过Western blot和ELISA对其复性效果进行鉴定.结果温度诱导7 h,目的蛋白的表达量达宿主菌总蛋白量的23.8%,其相对分子质量为30×103,Western blot及ELISA证实其重折叠和复性是成功的.结论成功地获得了人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达产物,可用于该分子X线结晶衍射及功能学实验.

关键词：CD226、PTA1、原核表达、重折叠复性

所属期刊栏目：22

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金30030130;国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004;国家自然科学基金39980006

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：587-590