PCR-RFLP结合克隆测序监测乙肝病毒拉米夫定耐药突变株的产生

摘要：

目的建立PCR结合酶切的方法监测慢性乙型肝炎患者体内拉米夫定耐药突变株的产生,并与PCR产物克隆后测序相结合,了解此方法的可靠性和可行性,同时用此方法筛查50例应用拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者中耐药株的发生情况. 方法拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者50例,治疗时间9个月～24个月,设计错配PCR结合限制性片段长度多态性方法,快速检测患者体内乙型肝炎病毒(HBV) 酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(Tyrosine-Methionine-Aspartic acid-Aspartic acid, YMDD)变异株的发生情况,对筛检耐药株阳性的标本应用PCR产物克隆后测序加以证实. 结果在50例服用拉米夫定患者中发现9例患者在用药超过9个月时出现拉米夫定耐药突变株 (YMDD变异株),其中YIDD变异5例,YVDD变异4例,后者有3例合并有L526M突变. 结论本方法在检测YMDD变异方面具有快速简便的特点,经克隆后测序证实,具有较好的可靠性.

关键词：乙型肝炎病毒、变异、聚合酶链反应

所属期刊栏目：21

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054105;国家自然科学基金30070695;国家自然科学基金39630280;军队科研项目96Z024

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：654-656