腺相关病毒载体pAGX(+)的构建

摘要：

目的构建腺相关病毒(AAV)载体并进行鉴定,以介导真核细胞的基因传递和表达. 方法以基因重组技术构建AAV载体,用Southern杂交、狭缝杂交以及激光共聚焦显微镜等鉴定构建的AAV载体. 结果成功地获得了重组AAV表达载体pAGX(+),藉报告基因EYFP鉴定pAGX(+),见pAEYFP经包装的重组AAV储存液的感染滴度达1.39×107 TU(transmission unit)/ml、复制滴度达1.94×1011颗粒/ml.Southern杂交表明EYFP基因获得成功拯救.rAAV/EYFP颗粒成功转导COS 7细胞,EYFP获得表达,并整合入COS 7细胞基因组,而藉质粒载体pEYFPCMV介导的转移,EYFP未能整合. 结论成功地构建了一个AAV载体,并成功地介导了基因的转移、表达和整合.

关键词：腺相关病毒载体、黄色荧光素蛋白EYFP、基因转移、基因表达

所属期刊栏目：21

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金39630300;中国医学科学院资助项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：547-551