10.3760/j:issn:0254-5101.2001.04.001
PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合
目的表达纯化PIP融合蛋白,探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法构建GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP,表达质粒在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-PIP融合蛋白,并用亲和层析柱加以纯化。利用这一融合蛋白通过Northwestern blot、UV-cross linking方法研究PIP与PRE的特异性结合。结果 GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP在大肠杆菌BL21中成功地诱导表达了可溶性GST-PIP融合蛋白,纯化后获得了单一的GST-PIP融合蛋白。Northwestern blot和UV-cross linking证实PIP与PRE特异性结合。比较两种方法,前者较后者特异性高,灵敏度低,而后者操作简便。结论表达和获得纯化的PIP融合蛋白,PIP与PRE特异性结合。
PIP、纯化、RNA-蛋白质结合试验、紫外交联试验
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R37(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金39670653;广东省自然科学基金960143;广东省科技厅科研项目;广东省卫生厅科技攻关项目
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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