PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合

摘要：

目的表达纯化PIP融合蛋白，探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法构建GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP，表达质粒在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-PIP融合蛋白，并用亲和层析柱加以纯化。利用这一融合蛋白通过Northwestern blot、UV-cross linking方法研究PIP与PRE的特异性结合。结果 GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP在大肠杆菌BL21中成功地诱导表达了可溶性GST-PIP融合蛋白，纯化后获得了单一的GST-PIP融合蛋白。Northwestern blot和UV-cross linking证实PIP与PRE特异性结合。比较两种方法，前者较后者特异性高，灵敏度低,而后者操作简便。结论表达和获得纯化的PIP融合蛋白，PIP与PRE特异性结合。

关键词：PIP、纯化、RNA-蛋白质结合试验、紫外交联试验

所属期刊栏目：21

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金39670653;广东省自然科学基金960143;广东省科技厅科研项目;广东省卫生厅科技攻关项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：355-358