人巨细胞病毒UL57基因原核表达克隆的构建、表达及初步纯化

摘要：

@@现有的IgM血清学试验对HCMV的诊断存在敏感性和特异性较差问题，其主要原因是迄今采用的抗原仍为从纯化的病毒颗粒中提取的病毒抗原性物质或粗提的病毒全抗原成分。近几年来人们致力于探讨能替代HCMV全病毒抗原的基因工程抗原，以完善IgM特异性血清学试验。本文通过构建HCMV DNA结合蛋白的一段基因的原核表达克隆，从而对表达产物的抗原性进行初步分析。
通过Oligosis软件设计UL57基因(aa540～604)两端引物，并在引物的5′端分别引入BamHⅠ和EcoRⅠ内切酶识别序列及保护位点。引物序列如下：P1：CTGGGATCCCCCAAAGGTGACGAC P2：GTGAATTCTCAGCGATTGAGGA。从感染的人胚肺成纤维细胞中提取和纯化HCMVAD169基因组，以纯化的核酸为模板，加入PCR反应体系进行UL57基因的扩增。

机标关键词：人巨细胞病毒、基因组、表达克隆、构建、病毒抗原、血清学试验、人胚肺成纤维细胞、敏感性和特异性、引物、抗原性、提取和纯化、软件设计、结合蛋白、工程抗原、反应体系、病毒颗粒、性物质、全抗原、内切酶、诊断

所属期刊栏目：21

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：203