10.3760/j:issn:0254-5101.2001.02.033
新型戊型肝炎病毒ORF2部分基因的构建表达及表达产物的抗原性分析
目的对新型戊型肝炎病毒ORF2的3′端部分基因进行重组质粒构建及融合表达,并对表达蛋白进行抗原性分析。方法用PCR方法从含有HEV ORF2基因的pGEM-T载体上扩增表达片段,双酶切后与原核表达载体pThioHisA构建重组质粒pThioHisA-T11。诱导表达后进行SDS-PAGE和免疫印迹分析。并用纯化的融合蛋白建立EIA检测方法,对40份抗-HEV IgG国家参比血清进行检测。结果含有pThioHisA-T11重组质粒的菌株表达相对分子质量为40×103的可溶性融合蛋白T11,免疫印迹证明融合蛋白T11能与抗HEV IgG发生特异反应。EIA检测结果显示,阳性参比血清符合率为80%(8/10),阴性参比血清符合率为87%(26/30),总符合率为85%。结论表达了新型HEV ORF2羧基端278氨基酸并证明有抗原活性,为今后提高HEV检出率奠定了基础。
戊型肝炎病毒、重组质粒、基因表达、血清学异质性
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R511;R37(传染病)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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