10.3760/j:issn:0254-5101.2001.02.030
黑曲霉菌pyrG基因的克隆与黑曲霉菌同源转化系统的建立
@@黑曲霉菌(Aspergillus niger)是一种不产生黄曲霉毒素的丝状真菌,它有生长迅速、易于培养、可大量产生分泌性蛋白质的特点,因此它除了在生产各种真菌代谢物及酶类的发酵工业上被广泛应用外,在基因工程中作为宿主菌生产蛋白质产物方面也受到很大重视和应用。为了将待表达的基因导入宿主菌,首先需要建立一个稳定有效的基因转化系统。以乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)基因作为标志基因并以该基因的缺陷株真菌作为受体菌的转化系统已被证明是一种十分行之有效的基因转化系统。乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶是尿嘧啶核苷酸合成中一种关键性酶,缺乏该酶的pyrG缺陷株不能在不含尿嘧啶核苷的培养基上生长。通过基因转化,向其导入含pyrG基因的质粒,可使其获得在不含尿嘧啶核苷培养基上生长的能力。如果将要导入的基因连接在该质粒上,此时pyrG可作为基因是否导入的标志。我们首次从黑曲霉菌ATCC 12049野生型菌株的基因文库中克隆获得全长pyrG基因,并在此基础上构建了表达性质粒载体,建立了pyrG基因为标志基因,以同型黑曲霉菌pyrG基因缺陷株为受体菌的同源基因转化系统。
黑曲霉菌、基因转化、克隆、同源基因、转化系统、尿嘧啶核苷、标志基因、质粒载体、真菌代谢物、脱羧酶、宿主菌、受体菌、乳清酸、基因缺陷、培养基、蛋白质产物、黄曲霉毒素、应用、丝状真菌、生产
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R37(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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