10.3760/j:issn:0254-5101.2000.03.002
致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析
目的 对致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)132株的papA基因进行克隆和序列分析.方法 根据F13型papA基因序列设计引物,并在二引物5′端加上限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ的酶切位点.采用此引物扩增132菌株p菌毛粘附基因群的papA基因,扩增产物克隆入质粒,选取阳性重组质粒进行核苷酸序列分析.结果 UPEC132株经PCR法扩增获得约700bp的papA片段,经克隆获得阳性重组质粒pCT20,对其进行序列分析显示papA 编码184个氨基酸多肽,与UPEC J96株papA相比较同源性达98%以上,于+43位和+73 位的错义突变对该菌毛的免疫学特性没有影响,保守的信号肽序列-16位出现同义突变,-3位缺失三联体密码使-1,-3位切割三联体由ANN变为ANV.结论 papA信号肽序列变异可能影响其正确的切割,致使132株(Mr为16.6×103)和J96株(Mr为19.6×103)p菌毛蛋白的相对分子质量不同.
肾盂肾炎、大肠杆菌、papA、聚合酶链反应
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R3(基础医学)
国家自然科学基金39470040
2007-08-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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