克隆、表达及测序一体化的原核表达载体pLCM182的构建及在细胞因子表达中的应用

摘要：

目的 构建利于PCR产物克隆、表达、测序一体化的载体.方法 构建载体并以酶切鉴定,该载体以强启动子pL及终止子rrnBT1T2控制外源基因转录及终止,以T7噬菌体基因10的RBS序列来提高目的基因的翻译水平,同时在目的基因的上下游引入测序引物序列以便于直接进行序列测定,从而减少克隆步骤,降低在多次克隆过程中碱基发生错误的机率.对多克隆位点改造,使表达外源基因时能对其翻译起始序列进行自由的设计.结果 构建并鉴定了pLCM182.利用该载体成功地表达了hIL-4、hIL-17及hIL-1RA及hIFN-β等数种细胞因子基因,表达量均高于报道水平.结论 该载体的构建极大地方便了基因克隆、测序及表达工作.

关键词：载体构建、表达载体、基因表达、大肠杆菌、细胞因子

所属期刊栏目：20

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金39730420

在线出版日期：2007-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：136-139