慢性束缚应激对小鼠食管上皮细胞间距增宽及炎症发生的研究

摘要：

目的 探讨慢性束缚应激对食管上皮细胞间隙增宽以及炎症发生的影响.方法 选用8周龄,雄性SPF级昆明小鼠20只,随机分为2组,每组10只.慢性束缚应激组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间2组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d.通过HE染色在光学显微镜下观察食管上皮组织病理学改变并进行间距测量.通过酶联免疫吸附(ELISA)和实时定量RT-PCR法检测食管组织中氧化应激指标(Nox-4、8-OHdG、MDA)、抗氧化蛋白(Nrf-2、HO-1)、紧密连接蛋白重要指标(Claudin-1、Claudin-4、Occludin、ZO-1)以及炎症因子(MCP-1、IL-1β、TNF-α)mRNA的表达量.结果 2组小鼠食管上皮细胞镜下测量的平均细胞间隙为对照组(0.64±0.04μm)、慢性束缚应激组(1.16±0.02μm);与对照组比较,慢性束缚应激组小鼠上皮细胞间距明显增宽,差异具有统计学意义(t=20.63,P<0.01).ELISA结果显示,慢性束缚应激组小鼠血液中Nox-4[(9.72±1.80)mg/ml vs(4.54±0.46)mg/ml]、8-OHdG[(4.94±0.58)mg/ml vs(1.44±0.16)mg/ml]以及MDA[(3.56±0.41)mg/ml vs(1.02±0.12)mg/ml]的释放浓度明显高于对照组,且差异具有统计学意义(t=25.54,19.62,13.67,P<0.01).RT-PCR实验结果显示,慢性束缚应激组食管组织中抗氧化蛋白Nrf-2和HO-1的mRNA转录水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(t=-10.36,-9.28,P<0.05).慢性束缚应激组紧密连接蛋白如Claudin-1、Claudin-4、Occludin及ZO-1的mRNA转录水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(t=-10.23、-9.65、-7.81、-8.75,P<0.01).慢性束缚应激组炎症因(MCP-1、IL-1β、TNF-α)的mRNA转录水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(t=31.42、42.37、46.83,P<0.01).结论 慢性束缚应激可能直接使食管氧化/抗氧化系统平衡紊乱,进而导致食管上皮细胞间距增宽及验证的发生.

关键词：慢性束缚应激、紧密连接蛋白、细胞间隙增宽、氧化应激、抗氧化蛋白

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资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金2018D01C134

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：182-187