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10.3760/cma.j.issn.0254-1424.2023.04.001

前颗粒蛋白在脑卒中后失语症患者外周血单核细胞中的表达

引用
目的:探究脑卒中后失语症(PSA)患者外周血单核细胞(PBMC)中失语相关基因前颗粒蛋白(GRN)的表达情况。方法:将对数生长期PC12细胞进行培养,细胞密度达到30%~50%时将其分为非特异性干扰组(基因对照组)和特异性干扰组(基因沉默组)。在PC12细胞中沉默GRN的表达后采用高通量转录组测序(RNA-seq)技术分析2组基因可变剪接事件发生情况。选取PSA患者10例(患者组)和健康受试者10例(对照组),2组受试者均于入组当天进行首次采血,并于入组12 d经皮(患者组出院当天)进行第二次采血。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定2组受试者外周血单核细胞(PBMC)中GRN的mRNA表达量的变化和kappaB结合蛋白相关核因子(NFRKB)的可变剪接事件发生情况。患者组接受常规言语治疗,于首次采血和第二次采血后即刻采用汉语失语成套测试(ABC)对其言语功能进行评估,并采用Pearson法分析GRN表达量的变化与ABC各项评分变化的相关性。结果:PC12细胞沉默GRN后,基因沉默组GRN的表达量与基因对照组GRN的表达量相比,差异有统计学意义( P<0.01)。两个样本间,发生显著差异可变剪接的基因共有237个,其中5′端发生可变剪接事件的基因数量最多。基因沉默组NFRKB可变剪接事件的发生概率与基因对照组比较,差异有统计学意义( P<0.05);基因沉默组NFRKB可变剪接事件的发生概率与基因对照组比较,差异有统计学意义( P<0.05)。PSA患者组首次采血血样PBMC中GRN的mRNA表达水平和健康组血样比较,差异有统计学意义( P<0.001);患者组第二次采血血样PBMC中GRN的mRNA表达水平与其首次采血血样比较,差异有统计学意义( P<0.001)。患者组首次采血血样PBMC中NFRKB基因发生可变剪接事件的概率与健康组比较,差异有统计学意义( P<0.05)。患者组第二次采血血样PBMC中NFRKB基因发生可变剪接事件的概率与首次采血比较,差异有统计学意义( P<0.01)。PSA患者第二次评估时的ABC量表口语表达得分显著优于其首次评估,差异有统计学意义( P<0.05),且在ABC量表的口语表达部分中,PSA患者第二次评估时复述评分,显著高于其首次评估,差异有统计学意义( P<0.05)。对患者组首次血样和第二次血样PBMC中GRN表达量的差异与PSA患者ABC量表口语表达评分的差异进行相关性分析,结果发现,GRN表达量的变化与口语表达能力的恢复呈正相关。 结论:GRN可通过调控NFRKB的可变剪接来促进PSA患者言语功能的恢复。

脑卒中后失语、外周血单核细胞、前颗粒蛋白、kappaB结合蛋白相关核因子

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浦东新区科技发展基金事业单位民生科研专项项目PKJ2022-Y30;上海浦东新区光明中医医院院级科技基金项目GMZYXK-202201;The Pudong Science and Technology Development Fundproject PKJ2022-Y30;Guangming Hospital of Traditional Chinese Medicine′s Science and Technology Fundproject GMZYXK-202201

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

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