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10.3760/cma.j.issn.0254-1424.2021.07.003

乳脂球-表皮生长因子8对脑缺血后小胶质细胞极化的调控作用机制研究

引用
目的:探寻乳脂球-表皮生长因子8(MFG-E8)在脑缺血后小胶质细胞极化的调控作用和作用机制。方法:选取C57BL/6小鼠40只,采用随机数字表法将其为假手术组、缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林(Colivelin TFA)组,每组10只小鼠。缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林(Colivelin TFA)组制作大脑中动脉梗阻再灌注模型(tMCAO),其中rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组小鼠在造模成功后立即进行脑梗侧侧脑室立体定位注射,分别给予总量2 μl,浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8和总量2 μl,浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8+总量2 μl,浓度5 pmol/μl的Colivelin TFA干预。造模成功1、3、5、7 d后采用行为学实验检测神经功能恢复情况,造模成功7 d后采用组织染色观察脑梗死灶体积比例,通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测小胶质细胞M1极化标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2极化标记物精氨酸酶1(Arg1)和小鼠类几丁质酶3样分子(Ym1)、MFG-E8的基因表达水平,通过免疫印迹实验检测MFG-E8、磷酸化信号转导与转录因子3(p-STAT3)和细胞因子信号传导抑制因子-3(SOCS3)蛋白表达水平。结果:行为学检测发现,缺血组、rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组在造模成功1、3、5、7 d后的转棒时间和mNSS评分与假手术组同时间点比较,差异均有统计学意义( P<0.05)。造模成功7 d后,与假手术组比较,缺血组MFG-E8基因和蛋白表达均显著降低( P<0.05),M1极化标记物iNOS基因的表达显著增高( P<0.05),M2极化标记物Arg1和Ym1基因的表达显著下降( P<0.05),p-STAT3/STAT3蛋白的表达显著上调( P<0.05),SOCS3/GAPDH蛋白的表达显著下调( P<0.05)。造模成功7 d后,与缺血组比较,rmMFG-E8组的梗死灶体积显著缩小( P<0.05)。造模成功7 d后,rmMFG-E8+Colivelin TFA组iNOS基因的表达较rmMFG-E8组明显增加( P<0.05),Arg1和Ym1基因的表达明显降低( P<0.05),p-STAT3/STAT3的表达显著上调( P<0.05),SOCS3/GAPDH的表达显著下降( P<0.05)。 结论:MFG-E8可通过STAT3信号通路促进脑缺血后小胶质细胞向M2型极化,促进脑缺血小鼠神经功能的恢复。

大脑中动脉梗阻再灌注模型、小胶质细胞极化、乳脂球-表皮生长因子8、信号转导与转录因子3

43

广东省自然科学基金2016A030313314;Natural Science Foundation of Guangdong Province2016A030313314

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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