miR-873-5p靶向调控VDAC1保护大鼠癫痫样神经细胞的作用机制探讨

摘要：

目的:研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法:通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果:与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(
P<0.05)，VDAC1表达显著升高(
P<0.05)，Bcl-2表达下调(
P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(
P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(
P<0.05)，而ROS水平显著升高(
P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(
P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(
P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(
P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(
P<0.05)，ROS水平显著降低(
P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(
P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(
P<0.05)。
结论:miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。

关键词：miR-873-5p、电压依赖性阴离子通道1、癫痫、神经细胞损伤

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资助基金：河南省教育厅科技计划项目20B320030；14A320004;Henan Province Education Commission Science and Technology Plan Project20B320030 and 14A320004

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：109-115