降钙素基因相关肽诱导前软骨干细胞成骨分化的实验研究

摘要：

目的：探讨降钙素基因相关肽(CGRP)体外定向诱导前软骨干细胞(PSCs)向成骨细胞分化的作用及其机制。方法将分离培养的大鼠乳鼠PSCs分别置于含有不同浓度(包括0,1×10－8 mol/L,1×10－9 mol/L,1×10－10 mol/L)CGRP的DMEM/F12培养液中培养,观察细胞形态学变化。于细胞培养后不同时间点采用CCK-8检测细胞增殖情况；再将细胞随机分为实验组及对照组,实验组置于含有CGRP(1×10－9 mol/L)的成骨培养基中培养,对照组则置于不含CGRP的成骨培养基中培养。对各组细胞进行茜素红染色并检测碱性磷酸酶(ALP)含量；采用RT-PCR法检测各组细胞成骨相关基因[如Runt相关基因转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)及骨钙蛋白(BGP)等]表达；采用Western blot法检测β-catenin蛋白表达以评估CGRP对Wnt/β-catenin通路激活的影响。结果与对照组(其培养基中无CGRP)比较,CGRP在体外能显著促进PSCs细胞ALP含量增加,矿化结节增大、增多,显著上调RUNX2、OPN、BGP等成骨相关基因及蛋白β-catenin表达,但对PSCs增殖无明显影响。结论 CGRP可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进PSCs向成骨细胞方向分化。

关键词：干细胞、前软骨干细胞、降钙素基因相关肽、成骨分化、Wnt/β-catenin通路

所属期刊栏目：38

分类号：R31;R68

资助基金：国家自然科学基金面上项目31070831

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：329-334