重复磁刺激对体外培养大鼠神经干细胞分化和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨重复磁刺激(rMS)对体外培养大鼠神经干细胞(NSCs)分化和凋亡作用的影响.方法 选取新生3d内的SD大鼠乳鼠双侧海马组织悬浮培养NSCs.在分化培养基下,将NSCs单细胞悬液进行贴壁诱导分化后,分为空白对照组和rMS组.空白对照组为自然分化无特殊处理,rMS组刺激参数为频率10 Hz、50％最大输出强度、每日1000个脉冲、共刺激7d.rMS组最后1次干预后1h内收集2组细胞进行免疫荧光染色分析分化神经元的比例,采用免疫印迹法(Western blotting)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白3(β-Ⅲtubulin)以及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达量.再将分化7d、无rMS干预的NSCs诱导凋亡,分为诱导凋亡组和诱导凋亡rMS组.诱导凋亡rMS组在诱导凋亡1h后进行rMS干预,刺激参数同上,诱导4h后收集细胞,通过流式细胞仪检测早期和晚期凋亡率,采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(Caspase-3,Bcl-2,Bax)的表达量.结果 rMS干预7d后NSCs分化为神经元的比例无显著性变化(P＞0.05),β-Ⅲtubulin、GFAP、BDNF相对表达量无显著性变化(P＞0.05).诱导凋亡rMS组的细胞凋亡率(9.14±4.72)％与诱导凋亡组的细胞凋亡率(15.38±4.55)％比较,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导凋亡rMS组的Caspase-3、Bcl-2、Bax相对蛋白表达量与诱导凋亡组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 频率10 Hz、干预7d的rMS对体外培养大鼠NSCs的分化无显著影响,但能减少诱导凋亡剂下神经细胞的凋亡,对神经细胞具有保护作用.

关键词：重复磁刺激、神经干细胞、凋亡、分化

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81071601,81171858;湖北省教育厅青年科研项目Q20144104 Project supported by the National Natural Science Foundation of China81071601,81171858;the Science Foundation for Young Scholars of Hubei provincical Department of Education20144104

在线出版日期：2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：13-18