低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞分化的实验研究

摘要：

目的 探讨体外培养下低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞(SC)分化的可能机制.方法 原代培养SD大鼠外周血干细胞,将传至第3代的SD大鼠外周血干细胞分为低频电刺激组、细胞外信号调节激酶(ERK)组、联合应用组、对照组.4组细胞均采用含2％胎牛血清的达尔伯改良伊格尔培养基(DMEM)进行培养,加入SC上清液后,低频电刺激组给予1h持续低频电刺激,ERK组在DMEM中加入浓度为50 mmol/L的抑制剂PD98059,联合应用组在ERK组基础上给予1h持续低频电刺激,对照组不行特殊干预处理.诱导前、后,利用噻唑蓝比色法检测4组细胞在570 nm处的吸光度A值,并采用Western blot法对诱导后各组细胞的增殖周期蛋白D1(cyclin D1)及细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK4)含量进行测定.结果 干预前,各组外周血干细胞的A750值无明显差异(P＞0.05)；干预后,低频电刺激组、ERK组、联合应用组、对照组A750值分别为(1.051±0.058)、(0.363±0.343)、(0.894±0.343)、(0.758±0.047),除ERK组外,其它各组A750值均较干预前升高(P＜0.05)；各组A750值组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).诱导后,低频电刺激组S-100、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及P75的表达率均高于其它各组(P＜0.05),ERK组各蛋白表达率则均低于其它各组(P＜0.05),联合应用组S-100、GFAP及P75的蛋白表达率介于低频电刺激组与ERK组之间,高于ERK组,低于低频电刺激组,差异有统计学意义(P＜0.05).各组组间ERK表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；与对照组比较,低频电刺激组和联合应用组磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平均较高(P＜0.05),ERK组则较低(P＜0.05)；与联合应用组比较,低频电刺激组p-ERK1/2、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平较高(P＜0.05),ERK组较低(P＜0.05).结论 体外培养条件下,低频电刺激可促进SD大鼠外周血干细胞增殖并诱导其向SC分化,且ERK信号传导通路是促进SC增殖分化的途径之一.

关键词：外周血干细胞、电刺激疗法、施万细胞

所属期刊栏目：35

分类号：R737.9;R329.28;R285.5

资助基金：浙江省嘉兴市科技计划2010AY1034

在线出版日期：2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：673-676