Bit1蛋白对胰腺癌细胞恶性生物学行为的影响及其临床指标的相关性分析

摘要：

目的 探讨Bit1蛋白对胰腺癌细胞运动、迁移、侵袭等恶性表型的影响及临床相关指标的相关性分析.方法 通过real-time PCR和免疫印迹法验证6株胰腺癌细胞株中Bit1蛋白的表达情况,分别挑选Bit1表达量最高和最低的胰腺癌细胞株作为细胞功能调节的工具细胞.采用polyHEMA铺皿实验构建胰腺癌细胞悬浮培养的模型,检测Bit1对胰腺癌细胞失巢凋亡的影响;利用Transwell实验观察Bit1对胰腺癌细胞运动迁移和侵袭能力的影响;通过免疫印迹法和共焦显微镜下观察Bit1对胰腺癌细胞上皮间质转化(EMT)表型过程相关分子标志物的影响;制作术后胰腺癌患者癌和癌旁组织微阵列并进行免疫组化染色,分析Bit1与胰腺癌患者临床病理特征的相关性.结果Bit1在胰腺癌细胞株PANC1中的表达量(基因:3.13±0.40,蛋白:1.77±1.00)最高,在Mia paca2中的表达量(基因:1.00±0.35,蛋白:0.23±0.45)最低.失巢凋亡检测结果显示,Bit1过表达可促进悬浮培养胰腺癌细胞Mia paca2的凋亡,而在PANC1细胞中敲减Bit1之后失巢凋亡受到抑制;Transwell实验检测结果提示,Bit1敲减之后胰腺癌细胞的运动、迁移及侵袭能力明显大于对照组(P<0.05),而Bit1过表达之后可受到明显抑制(P<0.05);免疫印迹法和共焦显微镜下观察证实Bit1敲减之后EMT过程的间质表型N-cadherin及Vimentin的表达上调,而上皮表型E-cadherin下调,相关转录因子β-catenin的表达也是上调的,Bit1过表达之后结果相反;Bit1的差异性表达与胰腺癌患者肿瘤的神经浸润相关(P<0.05).结论 Bit1可负向调控胰腺癌细胞的失巢凋亡发生及其运动迁移及侵袭能力,其对胰腺癌细胞恶性生物学行为的调控作用与EMT过程密切相关. 胰腺癌患者肿瘤中Bit1蛋白表达与肿瘤的神经浸润存在相关性.

关键词：胰腺肿瘤、肿瘤转移、失巢凋亡

所属期刊栏目：55

分类号：R73;R28

在线出版日期：2017-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：857-862