沉默Cdc42对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

摘要：

目的 探讨Cdc42-shRNA重组质粒对肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响.方法 Cdc42-shRNA重组质粒及空载体转染人肝癌细胞株SMMC-7721,建立Cdc42-shRNA组和对照组U6-control.采用MTT法检测细胞增殖情况,划痕愈合实验测定细胞迁移能力,Transwell法观察细胞的侵袭能力,免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和甲胎蛋白(AFP)表达水平.建立裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型,观察裸鼠成瘤情况,免疫组化法检测裸鼠瘤块中Cdc42的表达情况.组间数据两两比较采用t检验.结果 MTT尿实验结果显示,Cdc42-shRNA2组、U6-contol组和SMMC7721组细胞倍增时间分别为42.7、34.9、35.1h;划痕实验结果显示,转染Cdc42-shRNA2组和U6-control组细胞36 h相对迁移距离分别为(47.1±4.1)％和(86.6±5.3)％,差异有统计学意义(t=-10.21,P＜0.05);Transwell法检测结果显示,Cdc42-shRNA2组24 h穿膜细胞数为(18.2±2.1)个,低于U6-control组的(41.0±3.5)个(t=-9.67,P＜0.05);与对照组相比,Cdc42-shRNA组细胞的AFP和PCNA的蛋白表达水平降低;裸鼠成瘤实验结果显示,接种28 d后Cdc42-shRNA2组平均肿瘤重量分别为(335.1±178.2) mg,低于SMMC-7721组的(925.3±241.4)mg和U6-contol组的(910.5±225.6)mg(t=-4.47、-4.39,P＜0.05).免疫组化结果显示Cdc42蛋白在肝癌细胞质内广泛表达.其中SMMC7721组及U6-control组呈强阳性表达;SMMC7721/Cdc42-shRNA2组呈弱阳性表达.结论 沉默Cdc42表达,可以降低人肝癌细胞种植瘤的增殖、迁移及侵袭能力,抑制肿瘤细胞生长.

关键词：肝肿瘤、细胞周期蛋白质类、RNA干扰、短发夹RNA

所属期刊栏目：53

分类号：R737.9;R333.4;R977.11

在线出版日期：2016-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：957-962