10.3760/cma.j.issn.0529-5815.2013.04.019
应用纤维结合素建立新型兔腰椎间盘退变模型
目的 应用兔椎间盘内显微注射纤维结合素片段(Fn-f)的方法建立新型动物椎间盘退变模型.方法 34只新西兰大白兔随机分为3组:实验组(16只),L1~2,L2~3,L3~4,L4~5椎间盘髓核内显微注射30 kDa的Fn-f 25 μl;对照组(16只)相应髓核内注射磷酸盐缓冲液(PBS) 25 μl;空白组(2只)不做处理.术后4、8、12周处死实验组及对照组各4只兔,对髓核组织切片行番红O染色和HE染色,采用35S整合分析法检测髓核蛋白多糖合成.实验组和对照组中各取4只兔分别于术前及术后4、8、12和16周行腰椎数字化X射线摄影(DR)检查,测量计算椎间盘高度指数(DHI),术后16周处死,行番红O染色、HE染色和蛋白多糖合成测定.空白组2只兔处死后检测髓核蛋白多糖合成.结果 实验组兔椎间盘髓核细胞数目进行性减少,内层纤维环结构紊乱、破坏;髓核区4周后出现进行性缩小,术后16周髓核区消失,与内层纤维环组织不能分辨.实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率进行性下降(F =263.241,P=0.000);术后各时间点,实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率均较对照组显著降低(t=-27.010~-2.833,P<0.05).术后8周DR示造模椎间隙开始出现明显狭窄,进行性加重,12周时椎间盘及临近椎体前方出现骨赘,16周时骨赘增生明显.术后4周,实验组与对照组DHI百分比(DHI%)分别为96.5%±1.7%和97.4%±1.2%,差异无统计学意义(P>0.05);术后8、12和16周,实验组DHI%分别为85.6%±3.8%、77.2%±3.5%和65.5%±5.6%,均较对照组明显减低(t=-21.225 ~-10.795,P<0.01).结论 显微注射Fn-f可使兔腰椎间盘发生缓慢的、进行性的、与人椎间盘自然退变过程相似的退变,具有较好的模拟性和重复性,为椎间盘退变分子水平的研究提供了一种新型的、实用的动物模型.
疾病模型、动物、腰椎、椎间盘、纤维结合素
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R681.53;R445.2;R318
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2013-06-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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