乙型肝炎表面抗原结合人乳中乳铁蛋白的筛选与鉴定

摘要：

目的 乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)阳性产妇乳汁中含有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV),但母乳喂养不增加母婴传播风险.既往研究显示母乳具有与HBsAg结合的特点,本研究旨在确定母乳中能与HBsAg结合的成分. 方法 本研究于2015年6月至2017年2月在南京大学医学院附属鼓楼医院完成.取2例HBV血清学标志均阴性的健康产妇的乳汁,同时用牛乳和山羊乳为对照.通过间接免疫印迹技术,观察高纯度重组酵母HBsAg与乳清蛋白结合情况,结合蛋白质谱分析结果,进一步通过竞争抑制实验,确定母乳中能与HBsAg结合的蛋白成分. 结果 间接免疫印迹显示,2例母乳乳清泳道均可在分子量约80 000处发现明显的反应条带,而牛乳和羊乳无相应条带.该反应条带处的蛋白质经蛋白质谱分析,提示与5种蛋白质序列同源性为28.4%~93.4%,其中同源性最高(93.4%)的蛋白为人乳铁蛋白.使用纯化的重组人乳铁蛋白,进一步经间接免疫印迹验证,显示人乳铁蛋白能与重组HBsAg结合.竞争抑制实验证明,纯化的重组人乳铁蛋白能显著抑制HBsAg与乙肝表面抗体的结合,且随乳铁蛋白浓度降低,抑制率降低. 结论 母乳中人乳铁蛋白能与HBV结合.进一步研究乳铁蛋白能否抑制HBV的感染性,对阐明母乳喂养不增加HBV母婴传播具有重要意义.

关键词：乳、人、乳铁蛋白、乙型肝炎表面抗原

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资助基金：国家自然科学基金81672002;江苏省自然科学基金BK20161105;江苏省卫生健康委员会科技项目H201537 Fund program: National Natural Science Foundation of China81672002;Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK20161105;Project of Jiangsu Provincial Health CommissionH201537

在线出版日期：2019-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：457-460