缓激肽B2受体对人绒毛外滋养细胞生长及生物学功能的影响及可能机制

摘要：

目的 探讨缓激肽B2受体(bradykinin B2 receptor,B2R)对人绒毛外滋养细胞增殖和功能的影响及其可能机制. 方法 人绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞)分为4组:空载体质粒组转染pcDNA-3.1质粒;B2R表达质粒组转染pcDNA3.1-B2R质粒;小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)阴性对照组转染siRNA阴性对照序列;B2R特异性siRNA组转染B2R特异性siRNA序列.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和蛋白质印迹技术检测转染后细胞中B2R以及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9、细胞周期蛋白-1和血管内皮生长因子-A mRNA及蛋白的表达变化.采用细胞计数试剂盒-8及流式细胞术检测细胞活性以及细胞周期;细胞迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;细胞成环实验检测细胞成血管能力.采用t检验进行统计学分析. 结果 (1)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞中B2R mRNA(5.06±0.49与1.00±0.28,t=7.226,P=0.002)及蛋白表达水平升高(1.34±0.07与1.00±0.05,t=3.727,P=0.006);与siRNA阴性对照组相比,B2R特异性siRNA组细胞中B2R mRNA(0.34±0.05与1.00±0.17,t=3.667,P=0.021)及蛋白表达水平降低(0.74±0.03与1.00±0.05,t=4.097,P=0.006).(2)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞增殖活性升高(1.50±0.03与1.34±0.04),使细胞周期由G0/G1期向S期转变;与siRNA阴性对照组相比,B2R特异性siRNA组细胞增殖活性降低(1.06±0.04与1.20±0.02),并使细胞周期停滞于G0/G1期;差异均有统计学意义(P值均＜ 0.05).(3)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞迁移距离[(80.67±0.33)与(41.33±5.24)μm]、穿膜细胞数[(360.70±12.33)与(268.70±14.45)个]及细胞成环数增加[(28.20±2.47)与(14.00±1.67)个];与siRNA阴性对照组相比,B2R特异性siRNA组细胞迁移距离[(56.00±3.51)与(87.00±1.53)μm]、穿膜细胞数[(143.30±12.91)与(252.30±17.07)个]及细胞成环数减少[(6.25±1.49)与(15.75±2.02)个];差异均有统计学意义(P值均＜0.05).(4)基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9 mRNA,以及细胞周期蛋白-1和血管内皮生长因子-AmRNA及蛋白表达水平在B2R表达质粒组高于空载体质粒组,在B2R特异性siRNA组低于siRNA阴性对照组,差异均有统计学意义(P值均＜ 0.05). 结论 B2R可能通过促进基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9、细胞周期蛋白-1和血管内皮生长因子-A的表达,从而增强人绒毛外滋养细胞活性,以及迁移、侵袭及成环能力.

关键词：受体、缓激肽B2、滋养层、细胞系、细胞增殖

所属期刊栏目：21

资助基金：国家自然科学基金81571463;科教强卫工程;江苏省第十四批“六大人才高峰”高层次人才B类项目WSN-141;江苏省妇幼健康重点人才FRC201717;南京市临床医学中心妇产与遗传,3010204National Natural Science Foundation of China81571463;Science and Education Strong Defense Project;Jiangsu Province Fourteenth Batch of "Top Six Talent Peak" High-level Talent B ProjectWSN-141;Jiangsu Province Maternal and Child Health Key TalentsFRC201717;Nanjing Clinical Medicine CenterMaternity and Heredity,3010204

在线出版日期：2018-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：697-705