孤儿核受体Nr2a1对棕榈酸诱导的Min6细胞凋亡的影响及其可能机制

摘要：

目的 探讨孤儿核受体Nr2a1对棕榈酸诱导的小鼠胰岛β细胞系Min6凋亡的影响及可能机制.方法 通过脂质体转染体系在小鼠胰岛β细胞系Min6中转染Nr2a1的过表达质粒,研究Nr2a1在棕榈酸诱导β细胞凋亡中的作用.将细胞分为对照组、Vector组、棕榈酸+Vector组和棕榈酸+Nr2a1组,采用实时荧光定量PCR及免疫印迹检测棕榈酸对Nr2a1及刺激因子过氧化物酶体增殖激活受体γ共刺激因子1型α(PGC1α)表达的影响.通过Hoechst 33258对细胞核染色检测各组的细胞核形态,结合细胞凋亡蛋白酶3(Caspase-3)活性检测及免疫印迹分析细胞凋亡情况.进一步通过转染小干扰RNA抑制PGC1α表达后检测对Min6细胞凋亡的影响.结果采用t检验进行统计分析.结果 与Vector组相比,棕榈酸+Vector组活化的Caspase-3蛋白表达显示棕榈酸+Vector组较Vector组上升(3.158±0.105比1.000±0.096,t=-21.407,P<0.01);Nr2a1表达明显下降(0.184±0.015比1.000±0.069,t=16.386,P<0.01),蛋白水平也明显下降(0.446±0.050比1.000±0.097,t=7.179,P<0.01);其共刺激因子PGC1α的mRNA水平明显下降(0.625±0.047比1.000±0.090,t=5.242,P<0.01),蛋白水平也下降(0.505±0.044比1.000±0.027,t=13.499,P<0.01);过表达Nr2a1可以部分逆转棕榈酸诱导的Min6细胞凋亡,其活性Caspase-3的表达下降(0.418±0.011比1.000±0.007,t=63.739,P<0.01),且使得共刺激因子PGC1α在mRNA及蛋白水平分别均上升(1.961±0.198比1.000±0.072,t=-6.453,P<0.01;2.203±0.157比1.000±0.079,t=-9.688,P<0.01),而过表达Nr2a1的Min6细胞中抑制PGC1α表达后Cleaved caspase-3的表达较对照组上升(1.371±0.100比1.000±0.060,t=-4.514,P<0.05),差异均有统计学意义.结论 Nr2a1对棕榈酸诱导的小鼠胰岛β细胞系Min6细胞的凋亡有保护作用,PGC1α促进Nr2a1对Min6的保护作用.

关键词：糖尿病、2型、胰岛素分泌细胞、孤儿核受体类、凋亡

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分类号：R73;R74

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在线出版日期：2020-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：752-756