目的:观察卡格列净(canagliflozin,Cana)干预治疗高糖诱导人足细胞(human podocyte,HPC)损伤的疗效,并探讨其相关机制。方法:将HPC设为5组:正常组(normal glucose group,NG组)、甘露醇组(mannitol group,MA组)、高糖组(high glucose,HG组)、Cana低剂量(0.3 μmol/L)组、Cana高剂量(1.0 μmol/L)组。Western印迹法检测膜相关反向鸟苷酸激酶2(membrane-associated guanylate kinase inverted-2,MAGI2)、足细胞相关蛋白nephrin、钠-葡萄糖转运蛋白2(sodium-glucose transporter 2,SGLT2)及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cleaved-caspase1)表达。鬼笔环肽(phalloidin)染色观察HPC骨架变化。2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清中炎性因子白细胞介素(interleukin,IL)-18、IL-1β含量。结果:(1)与NG组比较,HG组MAGI2、nephrin表达水平较低(均
P<0.01),SGLT2表达较高(
P<0.01);足细胞形态变化及细胞骨架重构显著;细胞ROS水平较高(
P<0.01);NLRP3、ASC、cleaved-caspase1表达较高(均
P<0.01);细胞上清中IL-18、IL-1β浓度较高(均
P<0.05)。(2)与HG组比较,Cana组MAGI2、nephrin表达升高(均
P<0.01);细胞形态变化及细胞骨架重构减轻;SGLT2表达下调(
P<0.05);细胞ROS水平下调;NLRP3、ASC、cleaved-caspase1表达下调(
P<0.01);上清中IL-18、IL-1β浓度下调(均
P<0.05)。
结论:卡格列净能有效减轻高糖诱导的HPC损伤及炎性反应,其机制可能与抑制ROS/NLRP3信号通路相关。
坎格列嗪、血糖、足细胞、炎症、活性氧、NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3
40
国家自然科学基金青年科学基金81803921;上海市医学重点专科建设项目ZK2019A12;上海市普陀区卫生健康系统临床特色专科建设项目2021tszk02;National Natural Science Foundation of China81803921;Key Medical Discipline Project of Shanghai Municipal Health BureauZK2019A12;Clinical Specialty of Shanghai Putuo District Health System2021tszk02