miRNA-148b靶向AMPKα1通过氧化应激介导高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡

摘要：

目的 探讨微小RNA-148b(miRNA-148b)在高糖诱导肾小管损伤中表达变化及其作用机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组,培养48 h后,实时定量PCR法检测miRNA-148b表达;采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)在荧光显微镜下检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western印迹检测HK-2细胞腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1 (AMPKα1)、NOX2、NOX4、Bcl-2、cleaved-caspase3的蛋白表达.结果 培养48 h后,与正常糖组相比,高糖组、高渗组HK-2细胞内miRNA-148b表达上调(P＜0.01),ROS产生增多(P＜0.01),NOX2、NOX4蛋白表达增多(均P＜0.01),AMPKα1蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达减少(均P＜0.01),线粒体凋亡通路相关蛋白cleaved-caspase3蛋白表达增加(P＜0.01),差异均有统计学意义.结论 高糖上调体外培养HK-2细胞miRNA-148b的表达,靶向抑制AMPKα1的表达,促进NOX2、NOX4表达,活性氧产生增多,活化线粒体凋亡途径,激活caspase酶,诱导HK-2细胞凋亡.高糖的肾小管毒性部分是渗透压的影响.miRNA-148b可能参与了糖尿病肾病病理损伤的发生,有望成为糖尿病肾病新的治疗靶点.

关键词：糖尿病肾病、氧化应激、肾小管上皮细胞、miRNA-148b、AMPKα1

所属期刊栏目：35

资助基金：国家自然科学基金81770724、81270808;辽宁省自然科学基金201602821;辽宁省高等学校重大科技平台免疫皮肤病学重点实验室自主创新课题基金201303;沈阳市科技计划项目F16-205-1-40National Natural Science Foundation of China81770724,81270808;Natural Science Foundation of Liaoning Province of China201602821;Innovation Research Fund of Major Scientific and Technological Platform "Immune Dermatology Laboratory" in Higher Education Institutions of Liaoning Province201303;Science and Technology Planning Project of Shenyang CityF16-205-1-40

在线出版日期：2019-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：43-47