人脐带间充质干细胞共培养减轻高糖诱导的足细胞固有免疫反应

摘要：

目的 探讨人脐带间充质干细胞(HU C-MSCs)对高糖状态下Toll样受体(TLR)介导的足细胞固有免疫反应的影响.方法 将小鼠足细胞分为4组:正常糖浓度组(NG)、甘露醇组(NG+MA)、高糖浓度组(HG)、高糖浓度下足细胞与HUC-MSCs共培养组(HG+MSC).刺激72 h后,ELISA方法检测各组培养基上清中炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TLR配体热休克蛋白70 (HSP70)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达,实时定量PCR法检测各组细胞表面及细胞提取物中TLR2、TLR4的mRNA表达,Western印迹检测TLR2、TLR4、髓样分化因子88(MyD-88)、磷酸化P65(p-P65)的蛋白表达,免疫荧光染色观察p-P65在足细胞内的定位.结果 与NG组比较,HG组炎性因子IL-6、TNF-α、TLR配体HSP70、HMGB1的蛋白表达增多(均P＜0.05),TLR2、TLR4的mRNA和蛋白水平增加(均P＜0.05),MyD-88及p-P65蛋白表达增多(均P＜0.05),免疫荧光染色可见p-P65核内转移.与HG组比较,HG+MSC组炎性因子IL-6、TNF-α,TLR配体HSP70、HMGB1蛋白表达减少(均P＜0.05),TLR2、TLR4 mRNA和蛋白水平减少(均P＜0.05),MyD-88、p-P65的蛋白表达减少(均P＜0.05),免疫荧光染色示p-P65核内转移不明显.结论 高糖刺激可使TLR介导的足细胞固有免疫反应增强,HUC-MSCs共培养可通过抑制TLR通路减轻免疫反应.

关键词：糖尿病肾病、足细胞、干细胞、间充质、固有免疫、Toll样受体

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分类号：R94;R6

资助基金：国家自然科学基金81570653;山东省自然科学基金ZR2014HM045、2016ZRA13030、ZR2015PH021;济南市临床医学科技创新计划201503005;National Natural Sciences Foundation of China81570653;Natural Sciences Foundation of Shandong ProvinceZR2014HM045,2016ZRA13030,ZR2015PH021;Ji'nan Municipal Science and Technology Innovation Plan for Clinical Medicine201503005

在线出版日期：2018-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：849-855