转化生长因子β1体外诱导肾脏成纤维细胞活化中自噬的变化

摘要：

目的 探索转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导肾脏成纤维细胞活化过程中自噬的变化情况.方法 (1) 10 μg/L TGF-β1刺激大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)不同时间(0、12、24 h),倒置显微镜观察细胞形态变化,Western印迹检测细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)表达情况.(2)不同浓度TGF-β1(0、2、5、10、15、20 μg/L)刺激细胞1h,10 μg/L TGF-β1刺激细胞不同时间(0 min、7 min、15 min、30 min、1h、2h、4h、8h、12h),Western印迹检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62及自噬相关蛋白总哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(t-mTor)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTor)、Beclin 1表达情况.(3)血清饥饿处理细胞2.5 h后,加入10μg/L TGF-β1刺激细胞不同时间(0、1、4h),倒置显微镜观察细胞形态变化,Western印迹检测LC3、p62表达水平.结果 (1)TGF-β1刺激NRK-49F细胞后,细胞形态逐渐由星状转变为长梭形;随着刺激时间的延长,细胞活化标志物α-SMA、Col Ⅰ表达水平也逐渐增加(均P＜0.05).(2)TGF-β1增加NRK-49F细胞中p62蛋白表达(4h左右达峰值),同时测得细胞中p-mTor一过性增加(约30 min时达峰值)、Beclin1表达量逐渐降低(均P＜ 0.05).(3)TGF-β1降低了血清饥饿处理后的NRK-49F细胞中LC3-Ⅱ的表达,同时促使细胞p62蛋白表达升高(均P＜0.05).结论 在TGF-β1体外诱导肾脏成纤维细胞活化过程中,细胞自噬活性受到抑制,进而可能促进肾间质纤维化的发生和发展.

关键词：转化生长因子-β1、纤维化、成纤维细胞、自噬相关蛋白

所属期刊栏目：33

分类号：R73;R57

在线出版日期：2018-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：843-848