10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2017.05.009
瞬时受体电位阳离子通道蛋白6和整合素连接激酶在以蛋白尿为主要表现的慢性肾脏病中的表达
目的 观察以蛋白尿为主要表现的肾脏病患者的肾小球内瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)和整合素连接激酶(ILK)的表达和分布,并通过体外实验探讨过表达TRPC6对ILK的影响.方法 选取2012年到2013年于本院进行肾穿刺活检术且24 h尿蛋白量大于1 g的患者,通过免疫组织化学法观察TRPC6和ILK在肾活检组织中肾小球内的表达和分布.体外培养MPC5足细胞,以10-7 mol/L阿霉素(ADR)刺激足细胞12、24、36 h.采用脂质体2000试剂将pcDNA3.1(+)-TRPC6质粒、pcDNA3.1(+)转染入MPC5足细胞分别建立TRPC6过表达组和阴性对照组.Western印迹检测TRPC6和ILK蛋白的表达.结果 纳入膜性肾病14例,局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)13例,膜增生性肾小球肾炎15例,系膜增生性肾小球肾炎12例,增生硬化性肾小球肾炎10例,IgA肾病15例,紫癜性肾炎13例,狼疮肾炎15例,高血压肾损伤13例和糖尿病肾病14例,及正常肾组织9例.TRPC6主要表达于足细胞,除高血压肾损伤外,其余肾组织TRPC6表达评分均高于正常肾组织(均P<0.05);ILK表达于足细胞与系膜区,FSGS、狼疮肾炎及糖尿病肾病的肾组织中ILK表达得分均高于正常肾组织(均P< 0.05),其他肾病组织ILK表达高于正常肾组织,但差异均无统计学意义(均P>0.05);FSGS和糖尿病肾病肾组织中TRPC6和ILK的表达呈正相关(分别r=0.906,P<0.001;r=0.783,P=0.001).体外ADR刺激24 h和36 h时TRPC6和ILK蛋白的表达均高于正常对照组(均P< 0.05);TRPC6过表达组足细胞ILK蛋白表达与阴性对照组和正常对照组比较均增加(均P< 0.05).结论 以蛋白尿为主要表现的肾脏病患者的肾小球内TRPC6和ILK表达升高,尤其是FSGS和糖尿病肾病.上调足细胞TRPC6表达可增加ILK蛋白表达,两者可能共同参与足细胞损伤.
肾功能不全、慢性、足细胞、TRPC阳离子通道、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
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R77;R73
国家自然科学基金81170685;陕西省社会发展科技攻关项目2011K14-09-05National Natural Sciences Foundation of China81170685;Social Development Science and Technology Research Project of Shaanxi Province2011K14-09-05
2017-07-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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378-384