环孢菌素A对肾小管上皮细胞自噬-溶酶体通路的影响

摘要：

目的 探讨环孢菌素A(CsA)对肾小管上皮细胞(TEC)自噬-溶酶体通路的影响.方法 不同浓度(3、5、10 μmol/L)CsA刺激人近端肾小管上皮(HK-2)细胞24h.用MTT法检测细胞活力;AnnexinV-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光法检测细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ和p62表达;共聚焦显微镜下观察mRFP-GFP串联荧光标记LC3(tfLC3)质粒转染HK-2细胞后自噬体与溶酶体融合及降解情况;用流式细胞术检测HK-2细胞溶酶体对DQ-卵清蛋白的消化能力.结果 与对照组相比,5、10 μmol/L CsA组细胞活力下降(均P＜ 0.01);细胞凋亡数增多(均P＜0.05).与对照组相比,3、5、10 μmol/L CsA组细胞LC3-Ⅱ和p62表达增加(均P＜0.05);自噬体降解受阻;细胞溶酶体消化DQ-卵清蛋白能力下降(均P＜ 0.01).结论 CsA通过损害溶酶体功能而阻滞肾小管上皮细胞自噬通路,可能是CsA肾病的发生机制之一.

关键词：环孢菌素A、上皮细胞、肾小管、自噬、溶酶体

所属期刊栏目：33

分类号：R5 ;S43

资助基金：National Natural Science Foundation of China30971370;Research Foundation of Guangdong Medical College M2015016国家自然科学基金30971370;广东医学院科研基金M2015016

在线出版日期：2017-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：284-289