活性维生素D3对梗阻性肾病大鼠肾巨噬细胞趋化抑制因子及核转录因子κB/P65表达的影响

摘要：

目的 观察梗阻性肾病模型大鼠肾小管间质巨噬细胞趋化抑制因子(MIF)及核转录因子κB/P65(NF-κB/P65)的表达,探讨1,25 (OH)2VitD3在肾小管间质炎性反应中的干预作用.方法 用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞建立各组肾病细胞模型;用单侧输尿管结扎术(UUO)建立大鼠梗阻性肾病动物模型.用随机数字表法将健康成年雄性SD大鼠分为3组:假手术组(n=10)、模型组(n=10)和1,25 (OH)2VitD3(VD)组(n=10).VD组大鼠于术前2d给予1,25 (OH)2VitD3(6 ng/100 g)灌胃,假手术组和模型组仅予等量生理盐水灌胃.观察各组大鼠术后第2周肾功能、肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾组织中Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原ED-1、MIF、NF-κB/P65的表达;实时定量PCR检测肾组织MIF mRNA表达;Western印迹检测肾组织MIF、核转录因子κB抑制蛋白d亚基(IKBoα)及磷酸化IKBα(p-IKBα)蛋白的表达.肾小管上皮细胞中细胞免疫荧光检测MIF和NF-κB蛋白的表达,Western印迹检测MIF蛋白的表达和IKBα的活化.结果 与假手术组相比,模型组大鼠血肌酐和肾小管间质病变面积增加(P＜0.01);肾组织ED-1及ColⅣ的表达明显增加(均P＜ 0.01);肾组织MIF mRNA及蛋白表达亦明显升高(均P＜0.01);NF-κB/P65阳性细胞数增加,肾组织IKBα表达减少,p-IKBα表达增加(均P＜0.05).与对照组比较,模型组肾小管上皮细胞中MIF、NF-κB、p-IKBα蛋白表达增加,IKBα蛋白表达减少(均P＜0.05).与模型组相比,1,25 (OH)2VitD3组以上效应均受抑制(均P＜0.05).细胞模型结果与动物模型结果趋势一致.结论 单侧输尿管梗阻大鼠肾间质MIF的表达和NF-κB/P65的活性明显增加,1,25(OH)2VitD3可能通过下调MIF的表达,引起IKBα的磷酸化增加,从而抑制NF-κB/P65的活性,减轻肾小管间质的炎性反应,改善肾脏纤维化.

关键词：骨化三醇、疾病模型、动物、炎症趋化因子类、NF-κB、肾炎、间质性

所属期刊栏目：32

分类号：R692;R587.1;R977.24

在线出版日期：2016-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：691-697