微小RNA-21持续上调可促进马兜铃酸急性肾损伤后的肾小管间质纤维化

摘要：

目的 研究微小RNA-21 (miR-21)持续上调在马兜铃酸急性肾损伤后肾小管间质纤维化发生中的作用及其相关机制.方法 给予C57BL/6J小鼠一次性腹腔注射马兜铃酸(10 mg/kg),构建马兜铃酸急性肾损伤模型.分别在给药后第1、3、7、14、28天处死小鼠,留取血和肾组织标本.实验组小鼠于马兜铃酸给药前1h、给药后第5、10天分别经尾静脉给予anti-miR-21或anti-scramble(10 mg/kg).HE染色及Masson染色法观察肾脏病理改变;实时定量PCR法检测肾组织miR-21 mRNA表达;Western印迹和免疫组化法检测肾组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)及钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达变化. 结果 马兜铃酸给药3d后小鼠Scr水平明显升高(P＜0.01),组织学表现为严重肾小管损伤,至给药14 d后出现明显肾小管间质纤维化改变.肾组织α-SMA、Vimentin和Collagen Ⅰ在马兜铃酸给药7d后明显上调,第14天达峰值(P＜ 0.01);E-Cadherin于给药后第14天出现明显下调并持续至第28天(P＜0.01).实验组肾组织miR-21表达丰度于给药第7天后明显上调(P＜0.05),于第14天达到峰值(P＜0.01),并维持在较高水平.与anti-scramble+AA组比较,anti-miR-21+AA组小鼠Scr水平明显下降(P＜0.05);肾小管间质病变减轻;肾组织α-SMA、Vimentin、CollageⅠ和Collagen Ⅳ蛋白表达明显减少(均P＜0.05);miR-21靶基因PTEN蛋白表达上调,其下游蛋白磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(p-AKT/AKT)比值下降(均P＜ 0.05).结论 大剂量马兜铃酸1次给药后即导致小鼠发生急性肾损伤,并诱导急性肾损伤后的肾小管间质纤维化病变.抑制肾脏miR-21表达可部分逆转肾小管间质纤维化,可能与上调PTEN/p-AKT信号通路相关.

关键词：微RNAs、马兜铃酸、肾炎,间质性、纤维化、急性肾损伤

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资助基金：国家自然科学基金重点项目81430015;国家自然科学基金青年项目81200557;上海市科学技术委员项目14DZ2260200Key Program of National Natural Science Foundation of China81430015;Youth Program of National Natural Science Foundation of China81200557;Project of Science and Technology Commission of Shanghai Municipality14DZ2260200

在线出版日期：2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：292-299