蟾蜍灵通过上调维生素D受体表达缓解阿霉素诱导的足细胞损伤

摘要：

目的 探讨维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在蟾蜍灵保护阿霉素诱导的足细胞损伤中的作用.方法 (1)体外实验:乳酸脱氢酶(LDH)释放试验观察不同浓度蟾蜍灵(10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)对正常足细胞的毒性作用;阿霉素诱导体外小鼠足细胞损伤,使用10-7 mol/L蟾蜍灵干预48 h,Annexin V-FITC测定足细胞凋亡的变化;RT-PCR法测定VDR基因表达的改变;Western印迹测定VDR和nephrin蛋白水平变化,结合VDRsiRNA技术观察VDR在蟾蜍灵保护足细胞损伤中的作用.(2)体内试验:24只SD大鼠随机分为3组:对照组、阿霉素组、阿霉素+蟾蜍灵组,每组8只,使用TUNEL法检测肾组织足细胞细胞凋亡,间接免疫荧光法测定各组大鼠nephrin表达及分布,透射电镜观察大鼠足突和超微结构变化.结果 浓度不大于10-7 mol/L蟾蜍灵对正常足细胞无明显毒性.体内实验和体外实验显示阿霉素可诱导足细胞损伤,细胞凋亡数目增加,nephrin表达减少(P＜0.05),足突广泛融合,下调VDRmRNA和蛋白表达(P＜0.05);蟾蜍灵干预可上调VDR mRNA和蛋白表达(P＜0.05),减少足细胞凋亡,足突融合减轻,nephrin表达得到一定程度恢复(P＜0.05).VDR特异性siRNA下调VDR后可抑制蟾蜍灵的足细胞保护作用.结论 蟾蜍灵可能通过上调VDR的表达来发挥抗阿霉素诱导的足细胞损伤作用.

关键词：足细胞、受体,骨化三醇、蟾蜍灵

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资助基金：南京医科大学科技发展基金重点项目2014NJMUZD068;江苏省高校自然科学研究面上项目15KJD320005Science and Technology Development Fund of Nanjing Medical University2014NJMUZD068;Project of Natural Science Research of Jiangsu Province15KJD320005

在线出版日期：2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：278-283