C末端Src激酶在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞骨架重构中的作用

摘要：

目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激对大鼠肾脏及条件永生性小鼠足细胞C末端Src激酶(C-terminal Sre kinase,Csk)表达的影响,探讨Csk在AngⅡ诱导足细胞骨架重构中的作用.方法 24只无特定病原(SPF)级雄性Wista大鼠皮下埋置渗透性微泵,随机分为正常对照组和AngⅡ输注组(AngⅡ以400 ng· kg-1·min-1持续输注),于造模后2周和4周留取肾组织用于后续实验.采用透射电镜观察各组大鼠肾脏足细胞超微结构改变;Western印迹检测各组大鼠Csk蛋白表达水平;免疫荧光法检测肾脏Csk表达及分布改变.体外培养条件永生性小鼠足细胞(MPC),Western印迹法检测不同浓度AngⅡ(10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L)刺激MPC细胞6h及10-6mol/L AngⅡ刺激不同时间(0、1.5、3、6、12、24 h)后足细胞Csk蛋白表达水平.Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达,异硫氰酸荧光素(FITC)-鬼笔环肽(phalloidin)标记F-actin评价AngⅡ、细胞松弛素D(Cytochalasin D)诱导的足细胞骨架重构改变.结果 (1)透射电镜观察发现,AngⅡ输注组大鼠足细胞出现足突融合;(2)免疫荧光及Western印迹显示,AngⅡ输注组肾小球Csk表达增加(P＜ 0.05);(3)AngⅡ可诱导培养的小鼠足细胞Csk蛋白表达增加(P＜0.05),且呈时间和剂量依赖性;(4) Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达,可减轻AngⅡ诱导的足细胞F-actin重构,可减轻细胞松弛素D诱导的足细胞骨架破坏.结论 AngⅡ可诱导Csk表达上调,Csk可能参与了AngⅡ诱导的足细胞骨架重构及足突融合.

关键词：Src族激酶类、足细胞、细胞骨架、血管紧张素Ⅱ

所属期刊栏目：31

分类号：R734.2;R321.1;R698

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2016-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：842-847