白藜芦醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号

摘要：

目的 探索白藜芦醇是否影响足细胞中的Notch 1信号通路及其可能的机制.方法 分别使用RNA干扰(RNAi)技术和盐酸多西环素(doxycycline,Dox)诱导野生型(WT)和可诱导的Sirtuin 1(SIRT1)短发夹RNA(shRNA)转基因(CAGGS)足细胞SIRT1表达下降,重组小鼠Notch信号的Delta配体4(Delta-like ligand4,DLL4)诱导激活Notch1通路.实时荧光定量PCR法检测SIRT1、Notch1通路关键γ分泌酶mRNA及Notch1靶基因Hes1、Hey2的表达.Western印迹法检测足细胞内Notch1胞内段结构域(intracellular domain of Notch1,ICD1)、SIRT1、解聚素金属蛋白酶(ADAM) 10以及γ分泌酶复合物Presenilin 1和Nicastrin的表达.结果 白藜芦醇剂量依赖地诱导野生型小鼠足细胞Notch1信号胞内段ICD1表达以及下游产物Hes1和Hey2 mRNA表达增高.白藜芦醇可诱导Notch1蛋白水解酶γ分泌酶组分Nicastrin的mRNA和蛋白表达上升以及ADAM10蛋白的表达下降(P＜0.05),而这些变化在使用SIRT1RNAi后均被减弱(P＜ 0.05).重组小鼠DLL4可以增加Notch1通路靶基因Hes1和Hey2的mRNA水平,同时增加细胞核内ICD1的表达,盐酸多西环素孵育CAGGS足细胞显著降低SIRT1 mRNA水平(P＜0.05),48 h后SIRT1蛋白表达明显下降(P＜0.05),并且显著减弱DLL4的作用(P＜0.05).结论 白藜芦醇可以通过高表达分泌酶Nicastrin诱导足细胞中Notch1信号活化,SIRT1介导了白藜芦醇和DLL4诱导Notch1信号活化的作用.

关键词：足细胞、受体、Notch1、Sirtuin 1、γ-分泌酶

所属期刊栏目：31

分类号：R329;R733.71;R651.2

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;上海市自然科学基金

在线出版日期：2015-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：296-302