自噬在造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用

摘要：

目的 观察造影剂对肾小管上皮细胞自噬及凋亡的影响,探讨自噬在造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),以不同浓度(25、50、100、200 gI/L)造影剂碘普罗胺处理NRK-52E细胞1h或以50 gI/L碘普罗胺刺激NRK-52E细胞不同时间(0.5、1、3、6、12、24 h),吖啶橙染色观察细胞内自噬体形成,Western印迹检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率.雷帕霉素(Rap,1μg/L)或3-甲基腺嘌呤(3-MA,2 mmol/L)与碘普罗胺(50 gI/L)共处理肾小管上皮细胞后,Western印迹法检测各组LC3及自噬相关蛋白Beclin-1的表达,绿色荧光蛋白标记的LC3(GFP-LC3)转染后荧光显微镜观察GFP-LC3的表达,Hoechst-33342染色观察细胞凋亡.结果 (1)随碘普罗胺刺激浓度增加肾小管上皮细胞自噬体表达先上升后下降.(2)随碘普罗胺刺激浓度及时间的增加肾小管上皮细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达先上升后下降(P＜0.05).(3)碘普罗胺刺激后,肾小管上皮细胞的凋亡率呈浓度及时间依赖性增加(P＜0.05).(4)Rap与碘普罗胺共处理肾小管上皮细胞后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及GFP-LC3表达上调,细胞凋亡减少(P＜0.05);3-MA与碘普罗胺共处理肾小管上皮细胞后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及GFP-LC3表达下调,细胞凋亡增加(P＜0.05).结论 造影剂可诱导肾小管上皮细胞凋亡和自噬,小剂量造影剂刺激下肾小管上皮细胞自噬和凋亡同时发生,但高峰早于凋亡.在刺激早期一定程度增强自噬可抑制细胞凋亡,反之抑制自噬后细胞凋亡增加.

关键词：自噬、细胞凋亡、造影剂、肾小管上皮细胞

所属期刊栏目：30

分类号：R743.3;R692;R33-33

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：863-869