SHPT患者血清对内皮细胞凋亡的影响及klotho蛋白的保护作用

摘要：

目的 观察继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)患者血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡率、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性的影响,探讨klotho蛋白的保护作用及机制.方法 分别收集15例健康人、10例不伴SHPT的CKD5期患者、15例严重SHPT拟手术治疗患者的混合血清.体外培养HUVEC,分别以健康人血清(血清H)为正常对照,观察SHPT患者血清(血清S)、不伴SHPT的CKD5期患者血清(血清C)孵育HUVEC 24h后,以流式细胞术检测其对细胞凋亡率的影响.以不同浓度klotho蛋白干预24 h,检测HUVEC凋亡率,加或不加LY294002(PI3K/AKT特异性抑制剂),检测总AKT(t-AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)的表达(Western印迹法)及Caspase-3活性(分光光度法).结果 血清C、血清S均诱导细胞凋亡,且血清S诱导细胞凋亡作用较血清C显著(P＜0.05).50～ 100 μg/L klotho蛋白可部分抑制10％ SHPT血清作用下HUVEC的凋亡(P＜0.05),并上调p-AKT表达、抑制Caspase-3活性,且可被LY294002阻断.结论 与健康人血清相比,SHPT血清、不伴SHPT的CKD5期患者血清均可诱导内皮细胞凋亡,且SHPT血清诱导细胞凋亡的作用更为显著.klotho蛋白可部分拮抗SHPT血清所致HUVEC凋亡的作用.其抗凋亡的机制可能与上调p-AKT、抑制Caspase-3活性有关.

关键词：甲状旁腺功能亢进症、继发性、细胞凋亡、klotho蛋白

所属期刊栏目：30

分类号：R735.7;R363;R582.1

资助基金：国家科技支撑计划;江苏省卫生厅医学科研项目

在线出版日期：2014-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：856-862