PI3K/Akt信号调节腹膜间皮细胞上皮-间充质转分化

摘要：

目的 通过体内外实验探讨PI3K/Akt信号对腹膜透析腹膜间皮细胞上皮-间充质转分化(EMT)的调节作用.方法 40只12周龄ICR小鼠腹腔置管行腹膜透析,制备腹膜间皮细胞的上皮-间充质EMT小鼠模型,成膜后分为PD模型组和对照组.采用实时定量PCR、Western印迹和组织免疫荧光等方法检测腹膜组织磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(pAkt)的表达及EMT相关蛋白和mRNA的表达[包括紧密连接蛋白(ZO-1)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)].体外实验观察转化生长因子(TGF)β1对人腹膜间皮细胞(HPMCs) Akt磷酸化和核转位及ZO-1、Vimentin表达的影响.采用PI3K/Akt抑制剂LY294002预处理和负显性Akt(DN-Akt)质粒转染HPMCs,抑制P13K/Akt信号,观察其对TGF-β1诱导的HPMCs细胞ZO-1、Vimentin表达的影响.结果 与对照组相比,模型组小鼠第28天壁层腹膜组织明显增厚,上皮细胞标志物ZO-1 mRNA和蛋白表达降低,间充质细胞标志物Vimentin和FN的mRNA和蛋白表达升高,Akt磷酸化水平(pAkt)也明显升高(均P＜0.01).体外实验发现:TGF-βl抑制HPMCs细胞ZO-1表达,增加Vimentin和pAkt表达(均P＜0.01),且呈浓度依赖性;LY294002、DN-Akt处理可抑制pAkt表达,对TGF-β1诱导的HPMCs ZO-1 mRNA和蛋白下调表达有明显回复作用,并抑制TGF-β1引起的Vimentin mRNA和蛋白的高表达(均P＜ 0.01).结论 PI3K/Akt信号参与调节PD腹膜间皮细胞EMT,以PI3K/Akt信号为靶点可望为腹膜纤维化的防治提供一种新途径.

关键词：磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶、腹膜透析、腹膜间皮细胞、上皮-间充质转分化

所属期刊栏目：30

分类号：R737.9;R34;G804.7

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：363-369