IQGAP1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞凋亡中的作用及其机制探讨

摘要：

目的 研究IQ结构域GTP酶活化蛋白1(IQ domain GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞凋亡中的作用以及可能的分子机制.方法 体外培养条件永生性小鼠足细胞(MPC),以不同浓度(0、10-12、10-10、10-8、10-6mol/L) AngⅡ处理MPC或10-8 mol/L AngⅡ刺激不同时间(0、1、3、6、12、24 h),采用流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光、Western印迹法检测IQGAP1的表达及分布.IQGAP1 siRNA转染以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路(包含p38、JNK和ERK1/2 3条主要通路)抑制剂SB202190(10 μmol/L)、SP600125(25 μmol/L)或U0126(10 μmol/L)预处理MPC后,分别检测MAPK信号蛋白磷酸化水平及细胞凋亡率,并采用免疫共沉淀法研究IQGAP1与ERK1/2结合水平的变化.结果 (1)AngⅡ可以诱导足细胞凋亡,且凋亡率随着刺激时间和刺激浓度的增加而进一步增加.(2)正常足细胞IQGAP1主要分布于细胞膜和胞质,随AngⅡ刺激浓度和刺激时间的增加,胞膜和胞质IQGAP1表达逐渐增高,且随剂量和时间增高.(3)SB202190、SP600125或U0126分别预处理足细胞,可显著降低AngⅡ诱导的足细胞凋亡(P＜0.05),但不影响IQGAP1蛋白表达.(4)IQGAP1 siRNA转染足细胞显著下调ERK1/2磷酸化水平(P＜0.05),降低IQGAP1与ERK1/2结合量(P＜0.05),并抑制AngⅡ诱导的细胞凋亡(P＜0.05),但对于p38以及JNK通路无显著影响.结论 IQGAP1通过ERK1/2 MAPK信号通路介导AngⅡ诱导的足细胞凋亡.

关键词：足细胞、细胞凋亡、血管紧张素Ⅱ、ras GTP酶激活蛋白质类、细胞外调节蛋白激酶1/2

所属期刊栏目：30

分类号：R730.23;R285.5;R575.1

资助基金：中央高校基本科研业务费专项;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：210-216