10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2012.12.009
高糖通过转化生长因子β信号诱导肾小球内皮细胞向肌成纤维细胞转分化
目的 探讨高糖(HG)能否通过转化生长因子β(TGF-β)途径诱导大鼠肾小球内皮细胞向肌成纤维细胞转分化(EndMT).方法 体外培养大鼠肾小球内皮细胞(GEnC),分为正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、高糖组(HG,15、30 mmol/L)、TGF-β抑制剂组(HG+LY36,30 mmol/L葡萄糖+10 μmol/L LY364947)以及高渗对照组(M,5.5 mmol/L葡萄糖+25.5 mmol/L甘露醇)和溶剂对照组(D,5.5 mmol/L葡萄糖+1 ml/LDMSO).采用Western印迹法检测各组细胞内皮细胞标志物claudin5和肌成纤维细胞标志物α-SMA表达变化;实时定量PCR法检测细胞TGF-β1和TGF-β2 mRNA表达改变;免疫荧光法观察细胞形态学变化以及血管内皮细胞标志物VE-cadherin和肌成纤维细胞标志物α-SMA的表达.结果 与NG组比较,HG组claudin5蛋白的表达量随葡萄糖浓度增加而降低(P<0.05),α-SMA蛋白表达量随葡萄糖浓度增加而升高(P<0.05),TGF-β1和TGF-β2 mRNA表达均升高(P<0.05).与HG组比较,TGF-β抑制剂组claudin5蛋白表达量升高(P<0.05),α-SMA蛋白表达降低(P<0.05).高渗对照组和溶剂对照组改变差异无统计学意义.激光共聚焦免疫荧光结果显示,高糖处理可引起细胞形态由卵圆形向梭形改变,VE-cadherin表达减少,α-SMA表达增加;TGF-β抑制剂组细胞形态无明显改变.与HG组比较,TGF-β抑制剂组VE-cadherin表达增加,α-SMA表达降低(P<0.05).结论 高糖诱导大鼠肾小球内皮细胞TGF-β表达增加及内皮细胞-肌成纤维细胞转分化.抑制TGF-β可抑制高糖引起的转分化,提示TGF-β参与了高糖引起的肾小球内皮细胞转分化过程.
内皮细胞、成纤维细胞、转化生长因子β、肾小球、高糖、内皮细胞-肌成纤维细胞转分化
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R735.1;R692.5;R34
国家自然科学基金;中央高校基本科研业务费专项;广东省大学生创新实验项目
2013-03-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
950-955