10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2012.02.011
激活素A在高糖诱导的人肾小管上皮细胞中的表达变化
目的 通过体外高糖刺激的人近端肾小管上皮细胞株(HK-2),探讨激活素A(ACT A)的表达变化及卵泡抑素(FS)的干预作用.方法 HK-2细胞生长于DMEM培养基,待细胞生长至亚融合状态时,更换为无血清DMEM培养基使细胞生长同步化24h,然后将细胞分为以下5组:正常对照组(NG,5.5 mmol/L葡萄糖)、甘露醇对照组(MG,5.5 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,25 mmol/L葡萄糖)、HG+FS100组(25 mmol/L葡萄糖+100 μg/L FS)、HG+FS500组(25 mmol/L葡萄糖+500 μg/L FS).12、24、48 h后收集各组细胞及细胞上清液.Western印迹法检测各组细胞ACT A和p-Smad2/3的表达;ELISA检测各组细胞上清液转化生长因子β(TGF-β)和纤连蛋白(FN)的含量.结果 NG组细胞ACT A有微量表达,而HG组表达显著增加(P<0.05),呈时间依赖性.与HG组相比,FS干预组ACT A表达显著减少(P<0.05),呈剂量依赖性.与NG组相比,p-Smad2/3在HG组培养24 h后表达显著增加(P<0.05);FS可抑制p-Smad2/3的高表达(P<0.05).ELISA检测结果显示,与NG组相比,HG组培养12 h后TGF-β表达即显著增加(P<0.05),呈时间依赖性,FS干预对高糖诱导的TGF-3高表达没有影响.与NG组相比,HG组培养24h后FN表达显著增高(P<0.01),FS对此有明显抑制作用,呈剂量依赖性(P<0.01).结论 高糖能刺激HK-2细胞ACT A表达增加,从而促进肾小管上皮细胞FN的合成;FS可通过阻断ACT A的活化,减轻肾小管上皮细胞FN的合成.
糖尿病肾病、激活素类、卵泡抑素、Smad蛋白、纤连蛋白
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R692(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
国家教育部高等学校博士学科点基金新教师基金20090131120075
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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