apelin-13穿越非对称性二甲基精氨酸损伤的血管内皮层对血管平滑肌细胞的作用

摘要：

目的 探讨尿毒症毒素非对称性二甲基精氨酸(ADMA)致内皮完整性破坏的情况下,血管活性肽apelin - 13对血管平滑肌细胞收缩作用的影响.方法 利用Transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,分别设立实验组和对照组.实验组的内皮细胞经ADMA刺激后,在两组的上室中加入FITC标记的apelin - 13,测出不同时间下室apelin- 13的浓度,计算通透系数Pa值,并通过免疫荧光染色观察内皮细胞形态的变化.随后,利用Transwell小室建立上室内皮细胞、下室平滑肌细胞的双室模型.设立4个实验组:空白对照组、单纯ADMA作用组(ADMA组)、apelin- 13穿越组(apelin组)、ADMA作用后apelin- 13穿越组(ADMA+apelin组).内皮细胞经ADMA刺激后,于上室中加入apelin - 13,分别用免疫荧光及Western印迹法对平滑肌细胞中磷酸化肌球蛋白轻链( p-MLC)进行定性及定量检测.结果 ADMA可改变内皮细胞骨架及细胞间连接的结构,并显著增加单层内皮细胞对apelin- 13的通透性.实验组与对照组的Pa百分比随apelin - 13穿越时间而改变,在20 min时达最大值,与0时间点差异有统计学意义[(176.3±9.2)％比(100.3±1.5)％,P＜ 0.05].在双室模型中,ADMA+apelin组p-MLC表达量最高,与apelin组差异有统计学意义,ADMA组中也有少量p-MLC表达,3组与空白对照组差异均有统计学意义.结论 ADMA可通过影响细胞骨架及细胞间连接,导致单层血管内皮细胞对apelin - 13的通透性增高.apelin- 13穿越损伤的内皮层引起平滑肌p-MLC水平升高,可能参与了尿毒症高血压的发生.

关键词：尿毒症、高血压、非对称性二甲基精氨酸、apelin

所属期刊栏目：27

分类号：R4(临床医学)

资助基金：北京市科学技术委员会科技计划重大项目课题D09050704310903;首都医科大学基础-临床科研合作课题10JL26;教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金课题20101107120003

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：907-911