醛固酮通过PI3K-Akt-mTOR-p70S6K1信号通路促进系膜细胞增殖

摘要：

目的 探讨氧化应激依赖的表皮生长因子受体(EGFR)活化在醛固酮(ALDO)诱导的磷酸肌醇-3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路活化及系膜细胞增殖中的作用.方法 体外培养人肾小球系膜细胞,应用~3H-胸腺嘧啶(~3H-TdR)掺入法和细胞计数测定系膜细胞增殖;荧光探针2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸检测细胞内活性氧(ROS)的产生;Western印迹法检测EGFR、PI3K、Akt、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白p70S6激酶1(p70S6K1)磷酸化.结果 (1)ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式促进肾小球系膜细胞ROS产生,100 nmol/L ALDO刺激3 min,ROS产生即显著增加,刺激60 min达到高峰;1、10和100nmol/L ALDO刺激60 min,ROS产生分别是对照组的1.50、1.70和2.14倍.抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)能阻断ALDO诱导的系膜细胞增殖.(2)ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式诱导肾小球系膜细胞EGFR磷酸化,100 nmol/L ALDO刺激5 min,EGFR磷酸化显著增强,刺激60 min达到高峰;1、10和100 nmol/L ALDO刺激60 min,EGFR磷酸化分别是对照组的2.29、3.55和5.25倍.NAC和盐皮质激素受体(MR)阻断剂依普利酮能显著抑制ALDO诱导的EGFR磷酸化.而EGFR特异性抑制剂AG1478能完全阻断ALDO诱导的系膜细胞增殖.(3)100 nmol/L ALDO刺激60 min能显著增加PI3K、Akt、mTOR和p70S6K1磷酸化,其增加倍数分别为对照组的4.35、5.38、3.85和3.57倍,应用NAC和AG1478能阻断ALDO诱导的P13K、Akt、mTOR和p70S6K1磷酸化.(4)PI3K抑制剂LY294002、Akt抑制剂以及mTOR抑制剂雷帕霉素能显著抑制ALDO诱导的系膜细胞增殖,其抑制率达到50%～55%.结论 ALDO通过氧化应激依赖的EGFR磷酸化促进肾小球系膜细胞PI3K-Akt-mTOR-p70S6K1信号通路活化及细胞增殖.

关键词：系膜细胞、醛同酮、活性氧、表皮生长因子受体、磷酸肌醇-3激酶

所属期刊栏目：26

分类号：R9(药学)

资助基金：江苏省自然科学基金BK2007259;江苏省"科教兴卫"工程医学重点人才基金RC2007015

在线出版日期：2010-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：284-289