二甲基乙二酰基甘氨酸对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用及其机制

摘要：

目的 通过脯氨酸羟化酶抑制剂二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)稳定缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达.探讨其对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞(HKC)损伤的保护作用及其机制.方法 制作无糖缺氧复氧细胞损伤模型,用不同浓度的DMOG预处理,锥虫蓝染色和乳酸脱氢酶(LDH)活性方法检测细胞活力及损伤;Annexin Ⅴ和PI染色流式细胞仪技术检测细胞凋亡;实时荧光定虽PCR方法检测红细胞生成素(EPO)、热休克蛋白70(HSP70)和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA的表达;Western印迹法检测HIF-1α、活性caspase-3和Bcl-2蛋白表达.结果 正常情况下HKC细胞内几乎无HIF-1α蛋白表达,DMOG刺激6 h后HIF-1α蛋白及其靶基因EPO、HSP70和HO-1 mRNA表达均显著上调(均P＜0.01),且呈浓度依赖性.500 μmol/L 或1 mmol/L DMOG预处理可明显改善缺氧复氧诱导的细胞损伤,表现为细胞存活率升高(95.6%±1.8%、96.1%±1.0%比83.3%±3.1%);培养上清液中LDH活性下降;细胞凋亡减少(8.6%±2.7%、6.1%±2.3%比19.2%±4.0%)(均P＜0.05).另外,细胞内活性caspase-3蛋白表达显著下调,而Bcl-2蛋白表达则显著上调(均P＜0.05).结论 DMOG预处理可稳定肾小管上皮细胞内HIF-1α表达,对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤具有一定保护作用.其机制可能与促进EPO、HSP70和HO-1表达,抑制caspase-3活化,上调Bcl-2表达有关.

关键词：缺氧诱导因子1、α亚基、细胞凋亡、肾小管、上皮细胞、缺氧复氧损伤

所属期刊栏目：26

分类号：R5(内科学)

资助基金：上海市国际科技合作项目09410705800;上海市卫生局青年科研项目2008Y029

在线出版日期：2010-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：210-214