慢性肾衰竭大鼠血清诱发主动脉平滑肌细胞内质网应激及激活转录因子4活化

摘要：

目的 研究慢性肾衰竭(CRF)大鼠血清对主动脉平滑肌细胞内质网应激(ERS)和激活转录因子4(ATF4)的活化情况,探讨CRF血清对主动脉平滑肌细胞作用的可能机制.方法 建立CRF大鼠模型,采集其血清.采用原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,用不同浓度的CRF(10%和20%)血清刺激24 h,免疫荧光法观察ATF4核转位;Western印迹法检测CRF血清对平滑肌细胞糖调节蛋白78(GRP78)、P-PERK(pancreatic ER kinase)和ATF4蛋白表达的影响;凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测ATF4的DNA结合活性.结果 (1)CRF血清能明显上调平滑肌细胞GRP78蛋白表达,与对照组差异有统计学意义(P<0.01),高浓度CRF血清作用更为明显.(2)20%CRF血清与主动脉平滑肌细胞孵育24 h后,免疫荧光检查发现ATF4发生了核转位.(3)CRF 血清刺激后,主动脉平滑肌细胞p-PERK、ATF4蛋白表达均显著高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01),高浓度更为明显.(4)CRF血清刺激后,主动脉平滑肌细胞ATF4 DNA结合活性显著上调,与对照组差异有统计学意义(P<0.01).结论 CRF大鼠血清可诱发平滑肌细胞发生ERS,同时活化了PERK-ATF4信号通路.

关键词：肾功能衰竭、慢性、血清、肌细胞、平滑肌、内质网应激、激活转录因子4

所属期刊栏目：25

分类号：R28;R4

资助基金：国家自然科学基金30570763

在线出版日期：2009-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：706-710