钙三醇抑制肾间质成纤维细胞的活化

摘要：

目的 通过观察钙三醇对肾间质成纤维细胞增殖和凋亡的影响,及其对转化生长因子(TGF)β1诱导的成纤维细胞转分化和细胞外基质(ECM)合成的干预作用,旨在探讨钙三醇抗肾间质纤维化的潜在效应及相关机制.方法 体外培养大鼠肾间质成纤维细胞NRK-49F,分别以不同浓度TGF-β1(1、2、5和10 μg/L)和(或)不同浓度钙三醇(10-4、10-5、10-6、10-7、和10-8 mmol/L)进行干扰.MTT法观察细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡改变;实时定量PCR和Western印迹法分别检测细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生成因子(CTGF)及纤连蛋白(FN)的mRNA和蛋白表达.结果 钙三醇能明显抑制正常和TGF-β1(5 μg/L)诱导的NRK-49F细胞增殖(P＜0.01).经不同浓度钙i醇(10-4、10-5、10-6、10-7、和10-8 mmol/L)作用48 h后,NRK-49F细胞G2/S期细胞比例较TGF-β1刺激组均明显减少(分别为25.88%、21.81%、21.73%、23.28%、23.61%比27.42%,均P＜0.05),但对细胞凋亡无明显影响.NRK-49F细胞经TGF-β1刺激后,其α-SMA、CTGF、FN mRNA表达量显著上升,并在TGF-β1 1～5 μg/L的范围内呈剂量依赖效应.钙三醇能明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA、CTGF、FN mRNA表达上调(均P＜0.05),而不同钙三醇浓度干预组之间差异无统计学意义.钙三醇能显著降低TGF-β1诱导的α-SMA和FN蛋白表达(P＜0.05).结论 钙三醇可通过G1期停滞抑制大鼠肾间质成纤维细胞增殖,但不影响凋亡.钙三醇具有拮抗TGF-β1致肾间质纤维化的潜在作用.

关键词：骨化三醇、成纤维细胞、转化生长因子β、细胞增殖、细胞外基质

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分类号：R9(药学)

资助基金：上海市重点学科建设项目T0201;上海市卫生局资助项目05Ⅲ001;上海市卫生局资助项目2003ZD002

在线出版日期：2008-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：271-276