半胱氨酸天冬氨酸3依赖的bcl-2的降解在ATP耗竭诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用

摘要：

目的研究ATP耗竭再恢复诱导的肾小管上皮细胞凋亡中,半胱氨酸天冬氨酸(caspase)3激活介导bcl-2降解的作用.方法使用代谢抑制剂短暂阻断细胞内ATP的生成,诱导细胞凋亡.以Hoechst 33342染色观察凋亡细胞.应用编码人bcl-2 RNA的腺病毒感染细胞,使bcl-2在细胞内高表达.应用流式细胞仪,分析细胞凋亡和坏死的发生情况.以Western印迹检测caspase 3的活化以及bcl-2和bcl-2的降解产物.体外实验观察caspase 3和caspase 3特异性抑制剂DEVD对bcl-2降解产物的影响.结果高表达bcl-2组与对照组比较,细胞ATP耗竭60min、90 min、120 min和再恢复60min后,可减少细胞凋亡50%,P＜0.05.肾小管上皮细胞ATP耗竭时,caspase 3被激活,bcl-2出现降解;细胞内ATP恢复时,bcl-2降解产物继续增多,并出现细胞凋亡.体外应用caspase 3可使bcl-2降解,而caspase3的特异性抑制剂DEVD能明显抑制caspase 3对bcl-2的降解.结论肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时,caspase 3激活及其介导的bcl-2降解在细胞凋亡中发挥重要作用.

关键词：半胱氨酸天冬氨酸3、基因、bcl-2、凋亡、肾小管、上皮细胞

所属期刊栏目：21

分类号：R5(内科学)

资助基金：National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases Grants资助项目DK-53387,DK-52898;广东省博士启动基金31744

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：685-688