10.3760/j.issn:1001-7097.2005.09.007
人尿酸转运蛋白在肾小管上皮细胞的定位表达研究
目的明确人尿酸转运蛋白(hUAT)在人肾小管上皮细胞(HKC)内的定位表达情况.方法利用DNA重组技术构建hUAT.绿色荧光蛋白的融合基因分别导入人HKC及非洲爪蟾卵细胞.构建hUAT的谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体并制备抗hUAT的多克隆抗体.利用免疫荧光、Western印迹及激光共聚焦显微镜等技术观察hUAT在人HKC的定位表达.结果成功制备了兔抗hUAT-GST多克隆抗体.利用该抗体及构建的pEGFP-hUAT荧光表达载体进行Western印迹和免疫荧光检测,结果表明hUAT是一种膜蛋白,并且表达于人HKC胞膜上,Northern blot结果也表明人HKC在高尿酸环境中的hUAT表达水平明显上调(P<0.05).结论hUAT并非典型的膜转运蛋白,可能是以二聚体的形式才能够表达在细胞膜上,它在细胞内的定位表达可能需要特殊的转录调控机制.
高尿酸血症、尿酸、转运蛋白质类、肾小管、膜蛋白
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R6(外科学)
国家自然科学基金30121005;国家自然科学基金30100062;国家重点基础研究发展计划973计划G2000057000
2005-10-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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527-533